期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表达载体的构建及在HepG2细胞中的表达
唐霓；黄爱龙；张秉强；闫歌；向明确；蒲丹；郭晖
关键词：肝炎病毒, 乙型, 真核表达质粒, 1.3倍HBV基因组
摘要：目的构建1.3倍全基因乙型肝炎病毒(HBV)真核细胞表达载体,观察其在HepG2细胞中的表达. 方法从pGEM-HBV载体上将约4.1kb的1.3倍HBV全基因克隆至真核表达载体pCDNA3.1的HindⅢ位点,将构建的pHBV经Lipofectamine2000导入肝癌细胞系HepG2细胞中.分别在转染后24、48、72h测定HepG2上清液乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)的表达,细胞内HBsAg、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)免疫组织化学染色,Southern、northern杂交鉴定HBV的复制与表达. 结果成功构建了1.3倍HBV全基因真核表达载体,转染后24、48、72h细胞上清液中HBsAg分别为5.36±0.25, 13.42±1.24, 7.52±0.43;HBeAg分别为9.16±0.32, 22.75±1.49, 15.96±1.03.免疫荧光结果显示转染后24h细胞内HBsAg表达强,主要呈胞浆内弥漫性分布,HBcAg为核浆型分布,以浆型为主.Southern、northern杂交均证实细胞内存在各种病毒复制中间体和特异的病毒复制转录物. 结论该表达载体可介导高水平病毒复制,其转染细胞可望成为一种新型的HBV体外感染模型.
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