期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
人端粒酶催化亚单位锤头状核酶诱导肝癌细胞凋亡的作用
宋东坡；林菊生；傅桂莲；孙雪梅；孔心涓；黎培员；马昕
关键词：锤头状核酶, 人端粒酶催化亚单位, 载体构建, 基因治疗, 癌, 肝细胞
摘要：目的构建带有U6启动子的人端粒酶催化亚单位锤头状核酶真核表达质粒及其突变体,转染人肝癌细胞株SMMC7721,观察端粒酶活性、细胞增殖和凋亡的情况.方法用分子克隆技术构建由U6作为启动子、绿色荧光蛋白基因作为报告基因的核酶真核表达质粒pGTRz-U6及其突变体pGTmRz-U6,并以空质粒pEGFP-C1作为对照.Lipofectamine2000转染人肝癌细胞株SMMC7721,G418筛选阳性克隆.RT-PCR检测核酶及hTERT基因的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)作细胞生长曲线观察其生长情况,TRAP-银染法检测端粒酶活性变化,流式细胞计数(FCM)法检测细胞的凋亡水平. 结果核酶、突变核酶在SMMC7721中持续表达;凝胶成像系统分析SMMC7721-pEGFP-C1、SMMC7721-mRz、SMMC7721-Rz hTERT基因表达,用SPSS10.0软件对3种细胞进行分析,发现三者hTERT基因表达水平不同(F=47.987,P＜0.01);t检验分析得出SMMC7721-Rz hTERT基因表达明显低于SMMC7721 mRz和SMMC7721-pEGFP-C1(t值分别为-7.640和-11.602,P值均＜0.01).SMMC7721-pEGFP-C1和SMMC7721-mRz hTERT表达没有区别(t=0.178,P＞0.05).TRAP-银染及FCM结果分别显示,随着细胞的分裂,SMMC7721-Rz和SMMC7721-mRz细胞端粒酶活性逐渐降低,凋亡水平逐渐增加,7PDS细胞凋亡率分别是29.86%和9.87%,而对照组SMMC7721-pEGFP-C1凋亡率为3.36%.结论与突变核酶及空质粒相比,带有U6启动子的人端粒酶hTERT锤头状核酶具有明显降低hTERT表达和端粒酶活性,诱导细胞凋亡的作用,并且此作用随着细胞的分裂而逐渐增强,因此有望成为肝癌基因治疗的有效手段.
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