期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
肝细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立
王友亮；程萱；崔芳；程竞；吕娅歆；杨晓
关键词：转基因小鼠, Cre重组酶, LoxP序列, 白蛋白, 启动子
摘要：目的构建在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶的转基因小鼠.方法利用聚合酶链反应(PCR)获得小鼠肝细胞特异性启动子--白蛋白启动子,指导Cre重组酶在肝细胞中特异表达.通过受精卵显微注射的方法,将转基因载体导入小鼠受精卵中,获得转基因小鼠.利用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测转基因小鼠中Cre重组酶转录的组织特异性,并将转基因小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠进行杂交,利用PCR和Southern Blot进一步检测Cre重组酶在小鼠体内表达的组织特异性及其介导lox P位点之间发生重组的活性.结果获得了白蛋白启动子,构建了转基因载体pAlb-Cre.将转基因载体进行显微注射,共注射了837枚小鼠受精卵.PCR检测显示5 3只子代小鼠中有7只整合了Cre重组酶基因,Southern杂交结果证实共获得6只基因组上整合C re重组酶基因的首建者小鼠.RT-PCR结果表明其中3只阳性小鼠的子代鼠在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因.将在肝脏和睾丸中正确转录了外源基因的两只阳性鼠与Smad4条件基因打靶的小鼠杂交,通过PCR检测发现Cre转基因与Smad4条件基因打靶双阳性的子代鼠在肝脏中特异表达Cre重组酶,并能介导基因组中loxP序列间的基因重组,此结果通过Southern杂交得到了进一步证实.结论成功构建了在小鼠肝细胞中特异表达Cre重组酶的转基因小鼠,为利用条件基因打靶技术研究基因在肝脏发育及相关疾病中的功能及机制奠定了基础.
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