期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
乙型肝炎病毒在异种动物原代肝细胞中复制与表达的研究
姚云清；张定凤；黄爱龙；唐霓；王波；周卫平；任红；郭树华
关键词：肝炎病毒, 乙型, 复制, 表达, 原代鸭肝细胞, 原代大鼠肝细胞
摘要：目的探讨乙型肝炎病毒(HBV) DNA复制和表达的跨种属特异性. 方法分离培养原代大鼠肝细胞(PRH)与原代鸭肝细胞(PDH),电转HBV线性裸DNA (转染组每1×107 PRH或PDH 1.19×1012拷贝),分别于转染后1～15d各时点,收集PRH或PDH培养上清液与细胞裂解液,分别以Southern杂交分析和斑点杂交法分析HBV DNA的复制中间体与复制型式;以全自动免疫荧光检测系统检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg),以western免疫印迹、免疫斑点印迹和免疫细胞化学法检测乙型肝炎核心抗原(HBcAg);用逆转录聚合酶链反应检测HBV S/X mRNA.以单纯电击PRH/PDH为对照组. 结果 Southern杂交分析显示:PRH/PDH转染组HBV DNA均为游离复制型,可见4.0kb以下分子区带,包括松弛环状DNA、共价闭环形DNA和单链线形DNA等复制中间体;未见整合型HBV DNA,高分子(4.0～24.0kb) 区带.HBV DNA在PRH中表达蛋白产物水平,HBsAg于转染后各时点PRH裂解液中均可检测到(P/N值2.17～93.41,平均值为14.74±31.82,阳性≥2.1),峰值于1～3d;仅转染后1d PRH培养上清液中检测到HBsAg,P/N值为6.66;HBcAg和HBeAg仅于转染后1～3d时点内检测到低度表达;HBV S mRNA为阳性,而X mRNA为阴性.HBV DNA转染PDH组,转染后1、3、5d各时点PDH裂解液中HBsAg分别为15.24、14.55和5.13(P/N值,阳性≥2.1),HBeAg均为阴性;PDH培养上清液中HBsAg与HBeAg均阴性;上述各项指标于对照组均为阴性.斑点杂交法显示转染组各时点PRH/PDH裂解液中HBV DNA均为阳性,对照组为阴性. 结论 HBV DNA能在原代鸭肝细胞和原代大鼠肝细胞中复制和表达,为肝细胞内环境依赖性,无严格种属特异性限制.
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