过氧化物酶体增殖物激活受体γ抗肝细胞凋亡的机制

摘要：目的 研究靶向调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR γ)的表达及活性在非酒精性脂肪性肝纤维化中抗肝细胞凋亡的作用及其机制.方法 用高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏饮食(MCD)喂养小鼠8周,设立对照组:胆碱-蛋氨酸充足饮食;模型组:MCD喂养;PPAR γ激动剂组:用MCD加50mg·kg-1·d-1罗格列酮喂养; PPAR γ抑制剂组:用MCD喂养,腹腔注射PPAR γ抑制剂GW9662 1 mg/kg,每周3次; PPAR γ基因导入组:用MCD喂养,腹腔注射重组腺病毒质粒Ad-PPAR γ 1×1010 vp,每周3次;腺病毒空载体导入组:用MCD喂养,腹腔注射重组腺病毒质粒Ad-LacZ 1×1010 vp,每周3次; PPAR γ基因导入联合激动剂组;用MCD喂养,腹腔注射Ad-PPAR γ 1×1010 vp,每周3次,同时给予罗格列酮50 mg·kg-1·d-1.检测肝组织PPAR γ、Fas、Fas配体、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)mRNA及蛋白质表达.多组样本均数间差异比较用单因素方差分析,用LSD-t检验进行组间比较.结果 肝组织促凋亡基因Fas、Fas配体、Bcl-2相关X蛋白及caspase-3表达较对照组明显上调,mRNA相对表达量分别为3.59±0.35比1.11±0.37、4.37±1.03比1.09±0.33、4.27±0.48比1.03±0.10及4.93±0.67比1.12±0.24,两组比较,t值分别为2.49、3.28、3.25、3.80,P值均<0.01;蛋白质相对表达量分别为1.96±0.07比0.45±0.07、0.53±0.07比0.22±0.02、1.32±0.06比0.59±0.03及1.51±0.23比0.36±0.09,两组比较,t值分别为1.51、0.31、0.73、1.14,P值均<0.01.抑凋亡基因Bcl-2表达亦相应上调,mRNA相对表达量为3.95±0.34比1.20±0.19,两组比较,t=2.75,P<0.01,蛋白质相对表达量为0.57±0.01比0.29±0.01,两组比较,t=0.28,P<0.01.PPAR γ激动剂组Fas、Fas配体、Bcl-2相关X蛋白、caspase-3及Bcl-2 mRNA相对表达量分别为3.78±0.58、3.66±0.83、3.04±0.37、2.54±0.62、4.42±0.42,与模型组比较,t值分别为0.18、0.71、1.23、2.39、0.46,P值分别>0.05、>0.05、<0.01、<0.01、>0.05,蛋白质相对表达量分别为1.06±0.03、0.30±0.01、0.70±0.05、1.19±0.30、0.90±0.01,t值分别为0.90、0.23、0.62、0.31、0.34,P值分别<0.01、<0.01、<0.01、>0.05、<0.01;PPAR γ基因导入组mRNA相对表达量分别为2.31±0.16、2.71±0.23、2.52±0.27、1.79±0.32、5.97±0.72,与模型组比较,t值分别为1.28、1.66、1.75、3.13、2.02,P值均<0.05,蛋白质相对表达量分别为1.73±0.07、0.43±0.04、1.01±0.08、1.31±0.10、1.56±0.04,t值分别为0.23、0.10、0.30、0.20、0.99,P值分别<0.01、<0.01、<0.01、>0.05、<0.01.结论 PPAR γ靶向性激活和(或)PPAR γ基因导入可抑制促凋亡基因主导的信号转导通路激活,抑制肝细胞凋亡.