期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
微小RNA在HBx缺失突变体致肝细胞增殖中的作用及其机制
符小玉；谭德明；侯周华；胡志亮；刘国珍；欧阳奕；刘菲
关键词：癌, 肝细胞, RNA, 肝炎病毒, 乙型, 突变, 细胞增殖
摘要：目的 研究微小RNA (miRNA)在HBx缺失突变体致人肝细胞异常增殖中的作用及其相关机制. 方法 利用miRNA芯片技术检测稳定表达HBx-d382及HBx的L02(即分别含HBx基因缺失突变体HBx-d382及野生型HBx基因)细胞系中miRNA的表达,实时荧光定量PCR对上述miRNA进行验证.选取在L02/HBx-d382和L02/HBx细胞中均表达明显下调的两个miRNA:miR-338-3P、miR-551b进行功能研究,分为实验组(转染miRNA模拟物组)、阴性对照组(NC,转染miRNA阴性对照)及脂质体组(lipo,单加转染试剂),通过脂质体转染到细胞中,四甲基偶氮唑盐法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量PCR和Wstern blot检测细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的改变.采用SPSS 16.0统计软件,数据均进行了正态检验并符合正态性,组间均数比较采用成组t检验. 结果 (1)与L02/pcDNA3.0细胞比较,L02/HBx-d382细胞有6个miRNA表达上调,5个miRNA表达下调; L02/HBx细胞有4个miRNA表达上调,12个miRNA表达下调.实时荧光定量PCR验证的结果与芯片相一致.(2)转染了miR-338-31p-模拟物和miR-551b-模拟物后,L02/HBx-d382及L02/HBx细胞增殖均受抑制,细胞周期均阻滞在G1期,细胞增殖能力减弱.L02/HBx-d382细胞中,细胞增殖能力:lipo组、NC组、miR-338-3p组和miR-551b组分别为90.0％±1.3％、88.0％±1.6％、56.0％±6.1％和62.0％±6.4％,miR-338-3p组与:lipo组、NC组比较,t值分别为10.402、9.133 ;miR-551b组和与lipo组、NC组比较,t值分别为8.763、7.403,P值均＜0.01.L02/HBx细胞中,细胞增殖能力:lipo组、NC组、miR-338-3p组和miR-551b组分别为91.0％±1.7％、89.0％±2.1％、60.0％±7.7％和66.0％±9.3％,miR-338-3p组与lipo组、NC组比较,t值分别为9.105、8.074;miR-551b组与lipo组、NC组比较,t值分别为7.673、7.52,P值均＜0.01.实时荧光定量PCR检测结果显示细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的mRNA水平均无明显改变,但Western blot法发现上述基因的蛋白表达均明显下调,差异有统计学意义. 结论 ①HBx及其缺失突变体能影响L02细胞的miRNA表达谱;②在L02/HBx-d382细胞中下调更明显的miR-338-3p和miR-551b可能通过调控细胞周期蛋白D1、细胞周期蛋白G1和E2F转录因子的表达而调节了细胞的生长.
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