期刊简介

               中华医学会主办,重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊,反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平,报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。                

首页>中华肝脏病杂志
  • 杂志名称:中华肝脏病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1007-3418
  • 国内刊号:50-1113/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
中华肝脏病杂志2013年第12期

钙池操纵的钙通道在乙醇诱导HepG2细胞钙超载中的作用

刘慧敏;阎立惠;罗争;孙晓萌;崔瑞冰;李学会;阎明

关键词:肝疾病, 酒精性, HepG2细胞, 钙池操纵的钙离子通道
摘要:目的 研究乙醇诱导肝细胞钙超载的机制及钙池操纵的钙离子通道(SOCs)在其中的作用. 方法 使用浓度梯度的乙醇处理HepG2细胞,并观察细胞外钙离子螯合剂乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)及SOCs抑制剂2-APB对200μmol/L乙醇刺激的干预效应.实验分为:(1)正常对照组:磷酸盐缓冲液刺激;(2)乙醇慢性刺激组:分别给予25、50、100、200、400、800μmol/L乙醇,刺激24h或200 μ mol/L乙醇,刺激24、48、72 h; (3) EGTA处理组:200μ mol/L乙醇+ 0.5μmol/L EGTA,刺激24 h; (4) 2-APB处理组:200μmol/L乙醇+50μmol/L 2-APB,刺激24 h.细胞计数CCK8试剂盒检测细胞存活率;全自动生物化学分析仪检测HepG2细胞培养上清液ALT、AST漏出量;流式细胞仪检测HepG2细胞胞浆Ca2+浓度.荧光定量聚合酶链反应及蛋白质印迹法检测HepG2细胞中SOCs通道蛋白分子间质相互作用因子1及钙释放激活钙通道蛋白1的基因及蛋白表达.各组间均数的比较采用单因素方差分析或独立样本t检验. 结果 50、100、200、400、800 μmol/L乙醇刺激24h使HepG2细胞的存活率分别降低为97.3%±2.9%、83.4%±3.3%、67.8%±4.4%、37.5%±3.0%、14.1%±4.9%组间比较,F=99.945,P<0.01,细胞存活率呈浓度依赖性;细胞培养基上清液ALT漏出量分别增加为(14.2±2.8)、(17.7±3.2)、(20.0±2.6)、(21.6±1.3)、(24.9±1.7)U/L,组间比较,F=15.286,P<0.01 ; AST漏出量分别增加为(72.0±4.7)、(91.6±7.4)、(107.3±11.4)、(116.5±13.4)、(128.9±7.1)U/L,组间比较,F=39.674,P<0.01 ;使HepG2细胞的[Ca2+]i水平分别增高为正常对照组的(1.3±0.4)、(1.3±0.2)、(1.4±0.2)、(2.3±0.3)、(2.6±0.2) 倍,F=56.978,P<0.01.EGTA、2-APB干预使200μmol/L乙醇刺激后的HepG2细胞[Ca2+]i水平分别降至正常对照组的(1.8±0.2)倍和(1.9±0.1)倍,t值分别为7.201和8.183,P值均<0.01;同时将乙醇刺激后的细胞存活率分别增高至82.2%±3.9%和78.6%±1.5%,t值分别为6.692和6.124,P值均<0.01);使细胞培养基上清液ALT漏出量分别降低至(16.4±2.0) U/L和(17.2±1.9)U/L,t值分别为7.145和6.352,JP值均< 0.01 ;AST漏出量分别降低至(86.4±8.8)U/L和(88.3±6.3) U/L,t值分别为9.337和8.704,P值均<0.01.200μmol/L乙醇刺激明显增加HepG2细胞STIM1及Orai1的基因及蛋白表达量,且其表达增加持续至少72h. 结论 乙醇增高SOCs通道蛋白分子表达,增加SOCs介导的Ca2+内流,提示此可能是乙醇导致肝细胞[Ca2+]i增高及相关肝细胞损伤的重要分子机制.