期刊简介

               中华医学会主办,重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊,反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平,报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。                

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  • 杂志名称:中华肝脏病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1007-3418
  • 国内刊号:50-1113/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
中华肝脏病杂志2013年第03期

水甘油通道蛋白9短发夹RNA的构建与筛选及其对非酒精性脂肪性肝病细胞模型的作用

王川;亢渝俊;姜政;王丕龙

关键词:水甘油通道蛋白质类, RNA干扰, 基因沉默, 短发夹RNA, 脂肪肝, 非酒精性
摘要:目的 构建人水甘油通道蛋白9 (AQP9)短发夹RNA (shRNA),筛选出沉默效果明显的重组质粒,检测AQP9的sh.RNA对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型的作用.方法 设计合成针对人AQP9的小干扰RNA,退火形成双链shRNA后插入pGenesil-1质粒中,并将其转染L02肝细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot筛选出沉默效果明显的重组质粒.经油酸诱导L02细胞脂肪变性建立NAFLD细胞模型,通过油红O染色,测定甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量,检测重组质粒对NAFLD细胞模型的作用.数据比较采用方差分析.结果 经RTPCR及Western blot筛选,pshRNA-AQP9a转染组mRNA及蛋白质相对表达率为25.10%±1.19%及25.41%±1.96%,与未处理L02细胞组的39.33%±1.69%及35.08%±1.89%相比,均明显降低(P值均< 0.01);将重组质粒pshRNA-AQP9a转染NAFLD细胞模型能够降低其AQP9的mRNA及蛋白质表达量;油红O染色结果显示,油酸/pshRNA-AQP9a转染组细胞内脂质含量明显减少.油酸/pshRNA-AQP9a转染组细胞内甘油三酯、游离脂肪酸及甘油含量分别为(2.738±0.231) mmol/L、(1.182±0.168)mmol/L和(0.730±0.084) mmol/L,油酸组分别为(3.218±0.220) mmol/L、(1.538±0.193)mmol/L及(1.024±0.148) mmol/L,油酸/pshRNA-AQP9a转染组均明显降低(P值均<0.05).结论 降低AQP9表达量能够减轻NAFLD细胞模型的脂肪变性程度,为进一步研究AQP9对NAFLD的基因治疗奠定基础.