期刊简介
中华医学会主办，重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊，反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平，报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。
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首页>中华肝脏病杂志
- 杂志名称：中华肝脏病杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1007-3418
- 国内刊号：50-1113/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
用于筛选和评价抑制Ⅰ型胶原α1链基因表达的抗肝纤维化药物双报告基因系统的构建及其有效性鉴定
张伟；代晓朋；于虹；王鲁燕；孙世惠；李军锋；周育森
关键词：肝硬化, 转化生长因子β1, Ⅰ型胶原α1链基因
摘要：目的 构建一种双报告基因系统,用于筛选和评价抑制Ⅰ型胶原α1链基因(COL1A1)表达的抗肝纤维化药物. 方法 RT-PCR克隆转化生长因子β1(TGFβ1)全长基因,酶切后插入载体pcDNA3.1和pJW4303,构建真核表达载体pcDNA3.1-TGFβ1和pJW4303-TGFβ1;以基因组DNA为模板,克隆COL1A1启动子,插入报告基因载体pGL4.29,构建含COL1A1启动子的报告基因载体pGL4.29-COL1A1 promoter.上述重组载体鉴定使用酶切和序列测定.将pcDNA3.1-TGFβ1或pJW4303-TGFβ1与pGL4-COL1A1 promoter、内参报告基因载体pRL-null共转染入肝星形细胞系LX-2中,构建转录激活的双报告基因系统.使用地塞米松鉴定该双报告基因系统评价抗肝纤维化药物的有效性.组间比较用Studant t检验分析,P＜0.05为差异有统计学意义. 结果 成功构建TGFβ1的两种真核表达载体和含COL1A1启动子的报告基因载体.通过双报告基因检测两种方式表达TGFβ1对COL1A1启动子活性的影响,结果表明:分泌表达的TGFβ1使COL1A1启动子活性提高200倍以上(t=21.78,P=0.0001),非分泌表达的TGFβ1仅使COL1A1启动子活性提高了不到2倍(t=3.396,P=0.0274).成功构建了转录激活的双报告基因系统.用COL1A1表达抑制剂地塞米松作为模式药物来鉴定该系统的有效性,结果显示地塞米松对COL1A1启动子有抑制作用,且呈有剂量依赖性. 结论 成功构建了用于筛选和评价抑制COL1A1表达的抗肝纤维化药物的双报告基因系统并鉴定该系统的有效性.
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