期刊简介

               中华医学会主办,重庆医科大学第二临床学院病毒性肝炎研究所承办。本刊是全国性学术期刊,反映了肝脏疾病基础研究和临床实践的最新水平,报道了国内最新研究成果,介绍了国际学术动态,促进国际国内学术交流。内容包括肝脏疾病的病原学、流行病学、病理、病理生理、免疫学、发病机理、 临床诊断治疗及预防的实践经验和研究成果,以及新技术、新方法的重要进展。杂志适合县级以上医疗卫生机构从事肝病防治研究及临床实践的医务人员、预防和基础科研工作者阅读。                

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  • 杂志名称:中华肝脏病杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1007-3418
  • 国内刊号:50-1113/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国期刊全文数据库(CJFD)期刊收录:CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 知网收录(中), 文摘与引文数据库, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CA 化学文摘(美)
中华肝脏病杂志2014年第04期

体内转导HBV cccDNA法建立HBV慢性感染的小鼠模型

赵婷婷;李小松;殷文伟;蔡雪飞;张文露;陈飞兰;赖国旗;黄爱龙

关键词:肝炎病毒, 乙型, DNA, 共价闭合环状, 水动力注射, 持续感染
摘要:目的 通过体内转导乙型肝炎病毒(HBV) cccDNA,建立持续表达HBV抗原的小鼠乙型肝炎模型. 方法 取10只裸小鼠,将HBV cccDNA以3μg/只、2 μg/只、1μg/只分别注射实验组,同时以2ml等渗盐水注射空白组,分别于第1、3天,第1、2、3、4、5、6、8、10周进行尾静脉采血.用放射免疫法检测血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)浓度的变化;荧光定量PCR检测血清和肝组织中HBV DNA拷贝数;免疫组织化学法检测肝组织中HBV抗原特异性;苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化.使用SPSS 17.0对数据间相关性进行线性相关分析. 结果 小鼠在注射cccDNA后,从第1天开始于血液中检测到HBsAg和HBeAg的表达,两者均于第1周内迅速升高达到高值,并持续至第10周;其中HBsAg的表达水平经历了两个先上升再下降的过程(第4周为较低水平,第8周为较高水平),而HBeAg的表达水平经历了三个先上升再下降的过程(第2周、第4周为较低水平,第3周、第6周为较高水平);荧光定量PCR结果表明,10周后肝组织中HBV DNA的拷贝数随着高、中、低剂量组而递减,每克肝组织中HBV DNA拷贝数[(1.14E+07)±(6.51E+06)、(9.81E+06)±(9.32E+06)、(3.72E+06)±(2.35E+ 06)]与注射的cccDNA浓度(1.5、1.0、0.5 μg/ml)呈正相关(皮尔森相关系数r=0.979).10周后血清中HBV DNA的拷贝数为中剂量组高,其次为高剂量组,同时,各组血清中的HBV DNA拷贝数较肝组织中的低;免疫组织化学结果显示,实验组裸小鼠肝组织中存在HBsAg和HBcAg的表达,HE染色结果显示肝组织脂肪样或空泡样变性严重,肝小叶组织结构不明显. 结论 本研究利用HBVcccDNA质粒体内转导裸小鼠,成功建立了HBV在肝组织稳定复制并持续表达HBV抗原的裸小鼠模型,为进一步研究HBVcccDNA慢性持续感染的机制和抗病毒治疗打下基础.