布拉氏酵母菌对非酒精性脂肪性肝病大鼠肠黏膜屏障保护作用的研究

摘要：目的 观察布拉氏酵母菌对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法 实验用雄性健康SD大鼠36只,体质量(180±20)g,适应性喂养1周后随机分为对照组、模型组、治疗组,每组12只.对照组饲以基础饲料,模型组和治疗组饲以高脂饲料,喂养12周后治疗组开始给予布拉氏酵母菌灌胃[75×108 (CFU.kg-1.d-1)],对照组、模型组给予等渗盐水灌胃;20周时腹主动脉取血测定丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)、肠型脂肪酸结合蛋白(IFABP)、肿瘤坏死因子α(TNF α)、内毒素水平;观察大鼠肝脏病理学、肠组织病理学、肠黏膜紧密连接相关蛋白occludin蛋白的表达情况.留取粪便检测大鼠粪便大肠杆菌、拟杆菌的变化.多组间比较采用单因素方差分析以及SNK检验,非参数检验采用秩和检验. 结果 模型组大鼠的体质量(548.7±16.1)g、肝质量(17.516±1.112)g、肝指数(3.191±0.170),均明显高于对照组的体质量(423.2±19.2)g、肝质量(9.493±0.739)g及肝指数(2.241 ±0.112) (P值均＜ 0.05).治疗组体质量(499.1±18.1)g、肝质量(13.062±1.307)g和肝指数(2.616±0.230),与模型组相比均明显降低(P值均＜ 0.05).模型组TG(0.585±0.057)mmol/L、ALT(78.75±10.92)U/L、AST (205.74±10.05) U/L较对照组TG (0.373±0.081) mmol/L、ALT(30.99±8.59) U/L、AST(108.04±11.60)U/L显著增高(P值均＜0.05);治疗组的AST(194.42±13.74) U/L与模型组相比明显降低(P值均＜ 0.05);治疗组TG (0.541±0.072) mmol/L、ALT (72.36±9.87)U/L与模型组相比稍有下降(P值均＞0.05).模型组内毒素(0.306 ±0.054)EU/ml、TNFα(1.160±0.129) ng/ml、IFABP (288.76±59.17) pg/ml较对照组内毒素(0.20l±0.047) EU/ml、TNFα (0.917±0.115) ng/ml、IFABP (137.19±39.12) pg/ml显著升高(P值均＜0.05);治疗组内毒素(0.249±0.026) EU/ml、TNFα (1.042±0.078) ng/ml、IFABP(193.02±27.13)pg/ml与模型组相比均明显降低(P值均＜0.05).肝组织染色提示模型组肝细胞脂肪变较对照组明显增加(P值均＜ 0.05);治疗组肝细胞脂肪变(1.80±0.79)较模型组(2.90±0.32)明显减少(P值均＜ 0.05).对照组肠绒毛排列整齐,结构完整;模型组肠绒毛变短、局部有绒毛脱落,排列欠整齐;与模型组相比,治疗组肠绒毛轻度水肿,排列较整齐.模型组的肠黏膜occludin蛋白(0.042士0.006)较对照组(0.177±0.007)明显减少(P＜0.05);治疗组(0.049±0.010)较模型组表达稍有增加.模型组的大肠杆菌数量(5.98±0.08) log10CFU/g较对照组(4.00±0.09) log10CFU/g明显增加(P＜0.05),治疗组大肠杆菌(4.92±0.09) log10CFU/g较模型组数量明显下降(P＜0.05).模型组的拟杆菌数量(8.04±0.17) log10CFU/g较对照组(9.47±0.09) log10CFU/g明显减少(P＜0.05),治疗组拟杆菌数量(8.89±0.10) log10CFU/g较模型组明显增加(P＜0.05). 结论 高脂饮食可成功诱导大鼠NAFLD,经布拉氏酵母菌干预可以起到减轻体质量和改善肝细胞脂肪变的作用.布拉氏酵母菌能通过减轻NAFLD大鼠内毒素血症,减轻机体炎症反应.布拉氏酵母菌能调节NAFLD大鼠肠道大肠杆菌和拟杆菌的比例.